O sequenciamento clássico do DNA abriu muitas portas no estudo da genética. Essa técnica surgiu por volta da década de 1970 graças a um cientista chamado Frederick Sanger. Ele estudava principalmente a área da bioquímica e conseguiu dois Nobéis de química ao longo da vida.
Um desses prêmios veio em 1980 por conta do desenvolvimento desse método de sequenciamento genético.
Como funciona?
O sequenciamento Sanger é uma técnica que determina a sequência de DNA a partir de amostras isoladas . Ela começa com a amplificação do DNA-alvo por PCR e em seguida, a reação de sequenciamento, que é muito similar à uma PCR convencional, mas acontece com nucleotídeos marcados, uma cor fluorescente para cada base.[AS1] Foto de um sequenciador clássico.
Essa técnica também é chamada de sequenciamento por terminação de cadeia, pois quando uma base marcada é incorporada, ela impede que uma nova base seja adicionada. Desta forma, a reação gera diferentes tamanhos de fragmento com a última base estando marcada com uma das quatro cores possíveis. O sequenciador ordena esses fragmentos do menor para o maior e faz a leitura de cada uma das bases por meio de um sensor, gerando ao final a sequência de DNA desejada.
Mesmo sendo um método tradicional e mais antigo, ele continua sendo utilizado nos dias de hoje, não sendo totalmente substituído pelo sequenciamento de próxima geração ou NGS (Next-Generation Sequencing).
Aqui na GoGenetic realizamos o sequenciamento dos mais variados tipos de amostras através do método Sanger. Entre em contato conosco!